半固体穿刺如何

如何通过半固体穿刺,菌落形态来判断运动性

如果细菌在培养基表面及穿刺线上部生长，则为好氧菌。若沿穿刺线自上而下生长，则为兼性厌氧菌。如果在穿刺线下部生长，为厌氧菌。如果只沿穿刺生长者为无鞭毛，不运动的细菌。穿透培养基扩散生长者为有鞭毛，运动的细菌。

有压滴法（直接用载玻片滴一滴生理盐水后挑取活菌涂片，盖玻片小心盖住，镜下观察）和悬滴法（用凹形的载玻片，菌液滴于盖玻片上，倒过来形成悬滴，周围涂以凡士林，可保存长时间）两种。

菌落特征：大肠杆菌在斜面培养基上生长的菌落通常为圆形或不规则形，表面可能光滑或粗糙，颜色可能是白色、黄色或灰色等。运动性：大肠杆菌在半固体培养基穿刺接种时，通常会表现出运动性，即细菌可以在培养基中游动。

【答案】：C 提示 利用半固体培养基中的穿刺接种技术可以判断细菌的呼吸类型和运动情况。

接种细菌的三种方法各有什么用途

1、斜面接种法主要用于划线分离的单个菌落的纯培养，也可用于短期保存菌种或观察细菌某些特性。（3）液体接种法多用于一些液体生化管的接种。（4）穿刺接种法多用于观察细菌动力、保存菌种及做厌氧培养。

2、接种常见方法有：平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、液体接种法。

3、划线法：主要用于菌种分纯，获得单菌落由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来。

半固体穿刺保存法应加入的液体石蜡高度约

1、以上所介绍的5类菌种，一般都可以用半固体穿刺法保存，即把要保存的细菌穿刺接种于琼脂半固体内，经36℃培养18～24h后，再以无菌手续加入灭菌的液体石蜡油或肉汤，液体高度约为1cm，置4℃保存。

2、半固体穿刺保存法：将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。

3、在无菌条件下，用无菌吸管装入已长好菌丝的斜面试管，使液面高出斜面顶部1厘米左右。塞上无菌橡皮塞，竖直保存。此法可使菌种存活3年以上，但以1～2年移植一次为好。移植时不必倒出石蜡，用接种钩取一块菌丝即可。

半固体穿刺低温保藏法适合类型

1、鸡蛋斜面保存法：适于保存含有vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌，一般可保存一个月。半固体穿刺保存法：将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。

2、琼脂穿刺保藏法是一种半固体穿刺保存法。其方法是：用穿刺接种法将细菌培养物接种于半固体培养基内，经 37℃18-24h培养后，加一层无菌的液体石蜡，厚度约为 1cm，置冰箱保存。肠道杆菌及葡萄球菌等，一般可保存3-6个月。

3、长期保藏最好的方法就是冷冻干燥保藏，该法不分好氧厌氧，均可保藏，但制作过程需要专门的仪器设备。

4、石蜡油封藏法此法是在无菌条件下，将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面（或半固体穿刺培养物）上，石蜡油层高出斜面顶端lcm，使培养物与空气隔绝，加胶塞并用固体石蜡封口后，垂直放在室温或4℃冰箱内保藏。

5、半固体穿刺保藏法的优点是可以在4摄氏度的冰箱中保存普通细菌。缺点是保存时间短，只能保存3到6个月。

琼脂穿刺保藏法的具体原理是什么

1、半固体穿刺保存法：将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内，经35℃培养18～24h，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。

2、原理：KIA琼脂中含有乳糖浓度是葡萄糖的11倍，分解糖可产酸，使酚红指示剂变色；硫代硫酸钠可供给细菌产生硫化氢所需要的硫，铁盐可与硫化氢反应，生成黑色沉淀。

3、细菌保存于穿刺培养物中：一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下：用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落，针缓慢穿过琼脂到达瓶底，连续几次，盖上瓶盖拧紧，做好标记。室温下存放于暗处。