如何用peg浓缩蛋白

蛋白质沉淀法原理

1、蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。蛋白质的沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。

2、中性盐（硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等）的浓溶液使蛋白质沉淀析出的作用称为盐析，其原理是高浓度的盐能破坏水化层并中和电荷，从而使蛋白质聚集。

3、盐析法可以使蛋白质沉淀。盐析法的原理 蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目，亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。

4、盐析：向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐破坏胶体的稳定性，中和蛋白质所带的电荷，又可以破坏水化膜。此法沉淀蛋白质一般不变性，可通过透析出去中性盐，仍保持生物学活性。

求分离,纯化,鉴定γ球蛋白的具体方法(包括原理,步骤,预期结果,注意事项...

1、由于有机溶剂会使蛋白质变性，使用该法时，要注意在低温下操作，选择合适的有机溶剂浓度。

2、装柱、上样、洗脱，收集及蛋白质检查等操作步骤同凝胶层析）。四．浓缩经DEAE纤维素阴离于交换柱纯化的γ－球蛋白液往往浓度较低。为便于鉴定，常需浓缩。

3、蛋白质用醋酸纤维素薄膜电泳可分为五个区带，γ-球蛋白的等电点约为3，在pH6的巴比妥缓冲液中，带的负电荷最少，因此在电场中比其它蛋白质移动速度慢。

4、杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化，一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳法，包括区带电泳、等电点聚焦等作为最后的纯化步骤。

如何配置-0.8MPaPEG-6000处理液

1、压力0.3-0.5MPa。反应结束后，将反应物急冷至80-85℃，用水吸收，然后蒸馏，蒸出未反应的甲醇，釜液经阴离子交换树脂处理，所得甲醛溶液加入适量阻聚剂，搅拌混合，即得成品。

2、按照国标45钢热处理后的抗拉强度为600MPa，想要达到630780MPa，可以降低回火的温度试一试。

3、有机盐钻井液技术 关键词 有机盐钻井液；加重材料；钻井液性能；流变性；抑制性；室内试验；机械钻速；保护油气层；腐蚀；环境；现场应用；新疆准噶尔盆地南缘。

在溶菌酶的粗提取实验中,为什么将蛋清缓冲液PH调到4.7后又调到8.0...

这是利用了蛋白质在等电点的情况下溶解度下降析出来分离蛋白质的原理。

确保酶的活性；pH多选在酶蛋白的等电点附近；有机溶剂在中性盐存在时能增加蛋白质的溶解度减少变性，提高分离效果。

本实验利用加酸，当达到酪蛋白等电点PH=7时，酪蛋白沉淀。脱脂乳中除去酪蛋白后剩下的液体为乳清，在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白，还有溶解状态的乳糖，乳中糖类的98%以上是乳糖，可通过浓缩、结晶制取乳糖。

调整pH值：将Tris溶液用HCl溶液调整pH值至0。可以使用pH试纸或pH计来监测pH值的变化。补加水：将调整好pH值的Tris-HCl缓冲液用水稀释到所需的体积。储存：将配制好的Tris-HCl缓冲液储存于4℃冰箱中保存。

关闭出口，小心加入少量0.0175molL磷酸盐缓冲液（pH3）洗柱内壁。打开下端出口，待缓冲液进入凝胶床后再加少量缓冲液。如此重复三次，以洗净内壁上的样品溶液。然后可加入适量缓冲液开始洗脱。加样开始应立即收集洗脱液。

原因是牛奶中的主要蛋白质是以多聚体形式存在，其中酪蛋白以高度水合的酪蛋白磷酸钙酪蛋白胶束纳米形式存在，酪蛋白在ph大于6时的稳定性好，在水中有很好的溶解性和热稳定性，是好的乳化剂，保水剂，增稠剂。

如何将上相(也即PEG-2000)中蛋白质分离出来

1、聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。

2、蛋白质在用盐析沉淀分离后，需要将蛋白质中的盐除去，常用的办法是透析，即把蛋白质溶液装入秀析袋内（常 用的是玻璃纸），用缓冲液进行透析，并不断的更换缓冲液，因透析所需时间较长，所以最好在低温中进行。

3、透析：将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行。原理：利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。

4、③ 其他沉淀法 一．等电点沉淀法 两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低，不同的两性电解质具有不同的等电点，以此为基础可进行分离。

5、亲和层析：利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的一种层析技术。

peg8000沉淀噬菌体一定会有沉淀嘛

pH2）中，使终浓度为10mgml，加热到100℃，15min，在室温下缓慢冷却。用0.1体积的1M的Tris-cl调整pH至4后，分装小管保存在-20℃备用，当浓缩的溶液在中性pH条件下加热到100℃时，核糖核酸酶产生沉淀。

分离沉淀和上清液：离心结束后，样品会分为两部分，上层是上清液，而底层是沉淀。使用吸管或移液器小心地将上清液转移到另一个离心管中。收集沉淀：沉淀中含有细菌和噬菌体复合物，可以用于进一步的实验操作。

蛋白质和核酸。上清液是原始噬菌体的蛋白质外壳沉淀物是细菌及原始噬菌体的后代，包括其蛋白质和核酸。噬菌体是侵袭细菌的病毒，也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。

其中上清液是没放射性的蛋白质外壳与沉淀物的成分是有放射性的DNA。 32P标记T2噬菌体的DNA在细菌体内复制时，需要的酶是由细菌体内本身的酶。

这一次是大肠杆菌还没有裂解，也就是说噬菌体的增殖中释放的这一步还没有完成，在书上有句话是”短时间的保温“），所以说这时候噬菌体的DNA还在大肠杆菌体内，所以离心后蛋白质在上清液，DNA在沉淀中。

【答案】：B 聚乙二醇（ PEG）沉淀法能非特异性的沉淀抗原抗体复合物等大分子蛋白质，而不沉淀小分子抗原，优点是沉淀物完全且经济简便，但非特异性结合率高且沉淀物在温度高于30℃时易复融。